质谱检测项目报告目录第一部分 项目信息......................................................................................................31. 项目内容...................................................................................................................3第二部分 材料与方法..................................................................................................31.仪器和试剂.................................................................................................................32.方法.............................................................................................................................32.1 样品前处理......................................................................................................32.2 仪器参数设置..................................................................................................32.3 数据分析..........................................................................................................4第一部分 项目信息1. 项目内容根据客户提供的 1 例固体样本提供如下的技术服务：1）采用 LC-MS 法进行在正负离子模式下非靶向代谢物质检测2）利用图谱信息对比数据库进行代谢物质鉴定第二部分 材料与方法1.仪器和试剂2.方法2.1 样品前处理1) 取样品于研钵中，加入液氮，研磨至粉末2) 称取 50mg 样品，加入 1mL 75%乙醇水溶液，涡旋 60S, 超声 20min3) 15000g，离心 10 分钟，取上清经 0.22μm 有机膜滤头过滤，上机4) 以 75%乙醇水溶液为空白2.2 仪器参数设置流动相条件：1. 柱温40℃，上样量2μl2. 正离子模式：A：0.1%甲酸水；B：0.1%甲酸乙腈负离子模式：A：水（2mM乙酸铵）；B：乙腈流动相洗脱梯度表：DAD检测器条件：波长：190-400质谱条件：Agilent 6545A QTOF 质谱仪在控制软件（LC/MS Data Acquisition,Version B.08.00）控制下基于 Auto MS/MS 模式，进行一级、二级质谱数据采集，MS 采集速率： 6 spectrum/s,MS2 采集速率：10 spectrum /s
二级碰撞能样品用 10v 、40v 去检测，选择一级谱图中 10个离子进行二级扫描
一级质量扫描范围 m/z（50-1100），二级质量扫描范围 m/z（20-1100）
分别采用正模式采集，采集数据保存格式为 centroid；ESI 离子源参数设置如下： 离子源干燥气温度（Gas Temp ) ：320°C，氮气流量（Gas Flow ）：8l/min，鞘气流速（SheathGasFlow）：12l/min ，鞘气温度（SheathGasTemp）：350°C；毛细管电压（VCap ）： 4000 V（正离子模式）,3500 V（负离子模式）
2.3 数据分析1）转格式：数据首先使用 AnalysisBaseFileConverter 转换为.abf 格式2）使用 MSDIAL ver 4.24 软件对转换后 abf 文件进行峰寻找、峰对齐等数据处理，同时基于一级与二级图谱搜索自主整合 Metlin、MassBank、MoNA 和 HMDB 的数据库，版本V6.0，扣除空白，得到鉴定结果
3） MSDIAL 软件设置参数： Alignment:MS1 tolerance：0.01Da，Retention time tolerance：0.2min Identification: Accurate mass tolerance(MS1)：0.005Da (MS2):0.05DaIdentification score cut off：60%第三部分 结果1.样品 TIC 总离子流图Figure 1 正离子总离子图 TIC（路径：\\附件 2_TIC 总离子流图\正离子模式 TIC 图.pdf）Figure 2 负离子总离子图 TIC（路径：\\附件 2_TIC 总离子流图\负离子模式 TIC 图.pdf）2.鉴定结果Figure 3 鉴定结果（示例）（路径：\\附件 3_鉴定结果\正离子模式\正离子模式_10EV.xlsx）3.鉴定结果表头说明项目内容广州如期生物技术有限公司成立于2016年，始终以探索科学、服务客户为己任；致力于为高校、科研院所、医院、制药企业提供全面、便捷、专业的技术服务和产品
技术方面我们专注于生物医学领域：公司拥有完善的技术服务平台，覆盖分子生物学，转录组学、代谢组学、蛋白组学，表观遗传等多个科研平台
在产品方面，自主研究多种类型科研试剂盒20多项，如：COIP、CHIP、RIP等科研检测试剂盒，较之同类型的进口试剂盒，极大的降低了科研成本
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