一、PCR 1.pcr仪的概念 pcr仪 聚合酶链反应简称PCR (英文全称:Polymerase Chain Reaction) 由高温变性、低温退火及适温延伸等几步反应组成一个周期,循环进行,使DNA迅速扩增。PCR(聚合酶链反应)是利用DNA在体外摄氏95°高温时变性会变成单链低温(经常是60C左、右)时引物与单链按碱基互补配对的原则结合,再调温度至DNA聚合酶最适反应温度(72°C左右),DNA聚合酶沿着磷酸到五碳糖(5'-3))的方向合成互补链。简单来说,PCR仪就是利用基因聚合酶对特定基因做体外或试管内的大量合成,基本上它是利用基因聚合酶进行专一性的连锁复制的设备。目前常用的技术,可以将一段基因复制为原来的一百亿至一千亿倍。基于基因聚合酶制造的PCR仪实际就是一个温控设备,能在变性温度,复性温度,延伸温度之间很好地进行控制。 2.PCR仪的应用(1)分子生物实验室1.农作物类 (如各地区农业科学研究院,种子公司等,从事转基因作物的研究工作)2.兴奋剂检测中心(通过基因扩增方式对运动员提供的样品进行检测,定期双盲)3.医疗器械检测所(由厂家提供用于全国各地临床领域的PCR设备审批工作,各省均有)4.高校及其他第三方实验室(学术研究、课题实验、、制药司法鉴定等领域提供委托检测服务)(2)全新加入祖源检测1.遗传风险检测 2.体质特征检测 3.营养需求检测 4.运动健身检测 5.药物反应检测6.遗传变异携带(3)医疗领域 临床诊断:主要用来检测肿瘤病变情况及传染性疾病的筛查遗传学:亲子鉴定,试管婴儿,唐氏筛查,遗传类疾病器官移植:器官配型学术研究:新的诊疗方法及临床表现(4)分子生物实验室(1)公安机关犯罪嫌疑人的录入刑侦及物证提取(白银案)亲子鉴定(失踪人口)(2)疾病控制预防中心 病原判定 疫苗分析(3)动物疫病控制中心 病原判定 疫苗分析(4)出入境检验检疫 快速有效的为进出口岸的货物进行检测(5)食药监部门 样品筛查(转基因食品、掺假及病毒)(5)制药领域(1)活性多肽类 1982年第一个由基因工程菌生产的药物--胰岛素。(2)抗生素类 利用基因工程技术可以对生产菌种进行基因改造得到表达水平高、产品目的性强的菌株,如大肠杆菌生产青霉素酞胺酶。(3)细胞免疫调节因子类 在欧美等发达国家,肿瘤治疗的方法已经进入到更先进的阶段,通过提高人体自身免疫机能,临床广泛应用于抗肿瘤和免疫调节等方面。(4)疫苗类 可以克服传统疫苗价格昂贵、安全性能差等缺点能为目前尚无有效疫苗的某些特殊疾病如艾滋病提供有效的治疗手段。3.pcr仪的分类(1)按功能可分为普通定性PCR仪(市场占有率约80%)跟荧光定量PCR仪(市场占有率约20%)这两种都具有温度部分,但荧光定量PCR仪增加了对基因检测的光学部分。(2)按孔数分布可分为48孔.96孔.384孔。二、PCR无线温度校准装置Temp-Cali(q)PCR仪无线温度校准装置1.产品简介基因扩增仪的温场检测难度很高,对温度精度和响应速度要求都非常高,但借助PCR仪温场检 测系统,这项检测工作对于实际的计量老师而言却十分简单。只需要将PCR仪检测装置放入设备, 设置好梯度程序运行,系统即可自动进行温度数据采集并生成报告,单台基因扩增仪的校准时间 不超过30分钟。2.技术指标1、 探头配置(适用96孔PCR设备):不少于15个高精度温度探头,完全采用动态检测,精度不低于:±0.01℃;2、 系统精度:在0-120度之间,整个系统精度不低于±0.05℃;3、 探头采用PCB基板无线式设计,基板厚度不超过2mm(适用于荧光PCR设备);4、 测量数据可存储,存储容量:11万数据;5、 测量数据可无线发送,可实时观测;6、 可检测市场上如ABI7500、9700系列、伯乐CFX系列、A300型等96孔的普通及定量PCR设备。通过增配探头可以实现市场上 所有PCR设备的检测(包括普通PCR设备及定量PCR设备,如罗氏480型);7、 高精度探头每秒采样不低于2次;8、 每个探头均可溯源,完全依照 ITS-90 国际标准;9、 软件支持播放器式回放,便于分析、追踪PCR设备问题所在,温场可通过热成像图显示;10、 检测报告可提供: 升温、降温速度、过冲温度、实时温度的准确性、最大孔间温差、保温段的持续时间、温度的漂移(随时间) 等数据;11、 可与设定标准进行比较仪器是否合格,并根据国际ilac成员大数据库给出参考值;12、与世界相关组织标准相符。(GMP,GLP,ISO,FDA,CAP等);13、系统可对同一台PCR设备的多次测量进行稳定性分析;14、系统支持4 8 孔、9 6孔、3 8 4孔相适配的探头;15、提供国家级法定技术机构的校准证书。
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