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旷场实验作用:在行为测试中,通常采用多种实验方法来综合分析和评价动物的某种行为变化。因此,在安排不同的行为实验时,要注意实验之间的相互作用。因为旷场实验对小鼠影响不大,所以可以优先考虑动物进行旷场实验。起源:旷场实验,即open field test(OFT),又称开箱实验,是评价实验动物在新的不同环境中的自主行为、探究行为和紧张程度的方法。Hall于1934年首次提出了研究大鼠情绪变化的旷场实验。经过不断的发展和完善,旷场实验主要用于观察实验动物的自主运动能力、对新的不同环境的探索行为、紧张、狂躁、焦虑和抑郁等。由于其操作简单、可行性高、数据记录准确,已成为动物精神领域流行的行为测试方法。旷场实验箱,型号:XR-XZ301,上海欣软设备系统介绍:整个旷场实验系统由露地箱、摄像系统和视频记录分析软件组成。开盒的外壳形状可以是方形、长方形、圆形,市面上也有很多方形的盒子。以方形空旷场地为例,空旷场地箱可分为大鼠(100×100×50cm)和小鼠(40×40×40cm)两种尺寸,材质为灰色有机玻璃(灰色不反光,可用于黑小鼠和白小鼠实验)。实验中,将动物放置在空旷场地的特定位置,利用摄像系统监控动物在空旷场地的活动情况,利用VisuTrack视频记录与分析软件(上海新软)追踪动物的活动轨迹,收集并分析数据。前期准备:1.放置处理结晶的旷场实验箱(为了提高实验效率,可以对称放置四个实验箱,同时进行实验);2.将相机支架放在实验箱正上方,将相机连接电脑,在电脑上调整好相机的拍摄角度和焦距等参数,然后固定相机的位置(后续实验建议不要移动旷场实验箱和支架位置,否则需要重新调整焦距等参数);3.打开电脑中的VisuTrack行为视频记录与分析软件,编辑实验信息和动物信息等。,并调整软件记录的相关参数(也可以先用摄像系统录制实验视频,再导入视频录制分析软件进行分析)。实验步骤:1.将动物从饲养笼中取出,置于空地中央区域,背对实验者,实验者迅速离开;2.快速启动软件的视频捕捉或摄像系统的视频录制,记录动物在旷场活动5-10分钟;(也可以提前启动软件收藏,然后放置动物。在软件分析的过程中,可以设置扣除后的前期准备适应时间。)3.实验监测时间结束后,将小鼠取出放回饲养笼中,用75%酒精或实验消毒剂清洗整个敞箱,待空气干燥后,再更换小鼠,继续重复上述实验。实验指标:用旷场实验评价动物自主运动能力时,主要观察动物静止(小于100厘米/秒)、缓慢运动(100~300厘米/秒)和快速运动(300~500厘米/秒)三种运动状态所占的绝对时间和时间比。通过比较这三种状态的时间,得出动物运动能力的差异。此外,动物的活动能力也可以通过比较动物的平均速度、轨迹和总移动距离来反映。旷场实验用于评价动物的焦虑行为时,主要记录在旷场不同区域停留的时间、大小便次数、站立次数等。一般来说,老鼠喜欢紧贴墙壁,是因为它们的触地性,也就是说,它们会更多地四处移动,这在有焦虑样行为的老鼠身上更为明显:焦虑程度低的老鼠倾向于待在空旷地带的中心,也就是在空旷地带的时间更长。此外,还有如下几个结果参数:直立次数:又称垂直和站立次数,是指一对大鼠前肢腾空或紧贴箱壁,站立后放下爪子直立一次。直立时间反映了大鼠的探索行为和对新环境的好奇心。排便次数:又称粪便粒数,反映动物对陌生环境的紧张和恐惧程度。一般认为,排便的频率反映了啮齿动物的焦虑程度。(VisuTrack软件是市面上唯一一款可以自动统计粪便数量的动物行为分析软件。)理毛次数:又称理毛次数,是指老鼠对面部、四肢、躯干和生殖器的清洁行为。小鼠的修改次数是新的、不同环境的应激行为,说明此时小鼠的兴奋度较高。区域偏好指数对比图注意影响:1.小鼠相关因素:动物饲养环境、动物性别、背景、实验前是否伴有应激(断水断食)、昼夜节律。实验小鼠的年龄和性别需要一致。例如,雌性小鼠有发情周期,激素水平可能会影响它们的行为。2.实验装置的相关因素:开放场的形状和体积、实验持续时间、数据采集方式(摄像系统的类型)等,都可能影响实验和软件的检测效果,所以要尽可能的保持一致。3.实验者相关因素:注意实验者与动物之间的适应。同一批实验由同一名实验者操作,实验者用同样的方式抓取老鼠,手势温和。4.为了减少测试过程中非特异性应激刺激对实验动物的影响,每天在实验前触摸实验动物1-2分钟是必要的。5.做实验时,要有弱光,实验人员和实验动物要保持一定的距离。6.实验期间需要安静的环境。7.进行旷场实验时,必须对实验动物进行筛选。如果某些实验动物在水平或垂直方向明显低于平时同类实验动物的平均水平,必须提前淘汰。8.为了减少实验前动物对新环境的不适,必须在实验前三小时将动物送到实验室。9.尽量让实验动物的性别和年龄一致,因为激素的含量会对动物的行为产生一定的影响。10.注意动物的节律,24小时是一个主动活跃周期,期间可以做实验。
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